![zoޛ)j馟iG}M;۽Mwӽ4ם8unu~?z]^uu]Ͷm]]vL`=io]ky](http://img.resource.qikan.cn/qkimages/hbxm/hbxm201307/hbxm20130705-1-l.jpg)
对照组、硫酸铜溶液低剂量组（50 mg/kg）、中剂量组 （100 mg/kg）和硫酸铜溶液高剂量组（200 mg/kg）。硫酸铜溶液经口灌胃小鼠，对照组以等量生理盐水代替硫酸铜。每天中午进行灌胃，不限饮水，自由采食，共连续灌胃 15 d。试验期间，温度22～26 ℃，光照 12 h。
1.2.2 临床观察 试验期间每日进行临床观察，记录临床症状。在试验进行的第 10 天和第11天，高剂量组有 3 只小鼠死亡，中剂量组在第 14 天有 1 只小鼠死亡。死亡的小鼠立即取其脏器，余下的小鼠在试验期满时采用人工脱颈致死法进行剖杀，并取心、肝、脾、肺、肾进行观察，之后放入福尔马林固定液中固定。
1.2.3 病理组织学观察 取病变与正常组织的交界处的实质脏器 （心、肝、脾、肺、肾）制作病理组织切片，观察各个脏器的病理变化。
2 结果与分析
2.1 临床症状与病理变化
硫酸铜溶液高剂量组小鼠临床表现食欲废绝，精神沉郁，缩头，全身震颤，卧地不起，排黑褐色粪便，脾脏体积缩小，重量减轻，色泽变淡，肝呈黄褐色，质脆易碎，胆囊膨大充满蓝绿色胆汁，死亡病例还可见肾轻度肿大。硫酸铜溶液中剂量组小鼠表现为食欲废绝，精神沉郁，脾脏体积缩小，重量减轻，色泽变淡，肝呈黄褐色。硫酸铜溶液低剂量组小鼠无明显的变化。
3.2 病理组织学变化
肝脏：硫酸铜溶液低剂量组和中剂量组小鼠肝细胞肿大，胞浆内充满红染的细微颗粒，中央静脉、肝窦以及间质小血管内充满红细胞。硫酸铜溶液高剂量组小鼠肝脏出现明显颗粒变性和脂肪变性，肝细胞肿大，胞浆内充满大量红染的细微颗粒或圆形空泡，细胞呈现蜂窝状外观（图1）。部分病例可见局灶性坏死，内肝细胞索排列紊乱，肝细胞胞浆红染，细胞核出现固缩和碎裂（图2）。中央静脉内红细胞不清楚，只见红染丝网状物质充满血管。
心脏：在硫酸铜溶液中剂量和高剂量组小鼠均可见心肌纤维肿胀，出现许多红染的细微颗粒（图3）。心肌纤维间毛细血管内充满红细胞。
脾脏：在硫酸铜溶液中剂量和高剂量组小鼠可见脾脏白髓区变小，中央淋巴细胞和边缘区淋巴细胞数量减少，网状细胞增生，红髓血窦扩张充血（图4）。高剂量组部分病例脾脏白髓淋巴细胞出现坏死。
肺：在硫酸铜溶液中剂量和高剂量组小鼠可见小血管和毛细血管明显扩张，内充满红细胞（图5）。高剂量组中部分小鼠肺泡腔内有少量红染浆液（图6），部分小鼠肺泡扩张出现肺泡性肺气肿。
肾脏：硫酸铜溶液低剂量组小鼠肾小管出现颗粒变性，肾小管上皮细胞肿胀，使管腔变小或狭窄（图7），间质毛细血管扩张，充血。硫酸铜溶液中剂量组小鼠肾小管出现明显颗粒变性，管腔中有许多红染蛋白质物质，出现管型（图8）。部分肾小管壁细胞结构被破坏。硫酸铜溶液高剂量组小鼠肾小管上皮坏死、崩解、脱落于管腔中。
3 小结与讨论
本试验采用3组不同浓度的硫酸铜溶液对小鼠进行攻毒，分别为低剂量、中剂量和高剂量，时间为15 d。高剂量组小鼠在试验期间有死亡现象，临床病理症状表现为食欲废绝，精神沉郁，缩头，全身震颤，卧地不起，排黑褐色粪便，脾脏体积缩小，重量减轻，色泽变淡，肝呈黄褐色，质脆易碎，胆囊膨大充满蓝绿色胆汁，死亡病例还可见肾轻度肿大。中等剂量组小鼠表现为食欲废绝，精神沉郁，脾脏体积缩小，重量减轻，色泽变淡，肝呈黄褐色。低剂量组小鼠眼观则无明显变化。本试验结果为动物铜中毒的系统研究提供了动物模型，也可供临床或发病现场诊断和治疗铜中毒做参考，从小鼠发病时间、病程经过、死亡情况的综合分析，笔者认为硫酸铜溶液低剂量和中剂量可引起慢性铜中毒。硫酸铜溶液高剂量可引起小鼠的急性铜中毒，表明铜的中毒病理表现因动物种类和铜中毒剂量各异。
病理形态学的研究表明，小鼠铜中毒病变靶器官是肝脏、肾脏、消化道和免疫器官，与铜盐的刺激和腐蚀作用、铜在体内组织分布及蓄积特点和铜排出密切相关。由于铜盐具有强烈的刺激和腐蚀作用，铜盐进入消化道便引起剧烈反应和造成严重的病理损害，表现为肌胃角质层增厚、皲裂乃至呈绒毛状，肠黏膜上皮变性坏死，肠绒毛断裂，这是铜盐直接作用于胃肠道黏膜的结果，导致胃肠功能受损，铜被吸收进入体内后主要在肝脏蓄积，随着时间的增长铜的蓄积量大幅度增加。铜的蓄积一旦超过肝脏对其的利用，在释放入血之前便对肝细胞造成直接的损害作用，引起肝细胞肿大，颗粒变性和脂肪变性，胞浆内充满大量红染的细微颗粒或圆形空泡，细胞呈现蜂窝状外观。至于脏脏中蓄积的铜大量释放入血引起血铜升高时，肝铜含量仍未降低，且表现出极强的时间-剂量效应，故肝铜可作为评价铜状态的一个敏感指标。肝铜蓄积到一定程度时则大量释放入血引起血铜升高，同时。肾铜浓度也随之升高，造成肾小管上皮细胞的损伤，导致肾功能受损。
发生铜中毒时，造成了广泛性实质脏器的损伤和出血，尤其是肝脏、肠道和肾脏的病理性损伤更明显。肝脏：低剂量组和中剂量组小鼠肝细胞肿大，胞浆内充满红染的细微颗粒，中央静脉、肝窦以及间质小血管内充满红细胞。高剂量组小鼠肝脏出现明显颗粒变性和脂肪变性，肝细胞肿大，胞浆内充满大量红染的细微颗粒或圆形空泡，细胞呈现蜂窝状外观，部分病例可见局灶性坏死，内肝细胞索排列紊乱，肝细胞胞浆红染，细胞核出现固缩和碎裂，中央静脉内红细胞不清楚，只见红染丝网状物质充满血管。肾脏：低剂量组小鼠肾小管出现颗粒变性，肾小管上皮细胞肿胀，使管腔变小或狭窄，间质毛细血管扩张，充血。中剂量组小鼠肾小管出现明显颗粒变性，管腔中有许多红染蛋白质物质，出现管型。部分肾小管壁细胞结构被破坏。高剂量组小鼠肾小管上皮坏死、崩解、脱落于管腔中。因此在实际生产中若将铜离子作为饲料的添加剂，一定要确定好铜的添加量。
参考文献：
[1] 王长青，李靖爱，宋 茜.育成猪微量元素铜中毒的诊治[J].当代畜牧，2003，4（3）：31-33.
[2] 刘 璐.饮食铜的供给、状态及吸收[J].国外医学一地理分册，1997，18（l）：15-20.
[3] 王宗元.动物营养代谢病和中毒病学[M].北京：中国农业出版社，1997.5-8.
[4] 王幼明，王小龙.高铜的应用对畜禽的慢性中毒作用及对环境生态的影响[J].中国兽医杂志， 2005，37（6）： 36-38.
[5] 朱秀琴，张德寿.鸡铜中毒的临床病理学研究[J].中国兽医科技， 2005，25（12）：22-26.
[6] 刘成文，张怀礼，魏登山，等.猪铜中毒的诊断[J].中国兽医杂志，2001，37（3）：53-54.
[7] 党晓鹏.曹光荣.绵羊铜中毒研究进展[J].国外兽医学一畜禽疾病，1990，4（2）： 4-6.
[8] 姚远峰.猪滥用饲料添加剂引起铜中毒[J].广西畜牧兽医.1997，13（3）：59-63.
[9] PUSILLO G. Copper toxicity in sheep[J].Animal Science Abroad，2000，5（1）：48-49.
[10]沈炳玲，颜利求，秦 毅，等.锌对家免心肌缺血再灌注损伤后血清心肌酶影响[J].天津医科大学学报，2004，10（2）：185-187.
[11] 崔恒敏，陈怀涛.雏鸭铜中毒的实验观察[J].中国家禽，2003，25（11）：8-10.
[12]舒港亮，胡才喜.肉用鸡硫酸铜中毒诊断报告[J].江西畜牧兽医杂志，2006，10（4）：58-58.
[13]耿果霞，孙联辉.添加高铜制剂对成年鸡血液学指标的影响[J].西北农业大学学报，1998，26（1）：51-54.
[14]徐世文，迟玉美.铜缺乏与家畜疾病[J].黑龙江畜牧兽医， 1998，4（3）： 40-41.
[15]李建喜，王学智，杨志强. 钼和铜对小鼠抗氧化机能的影响[J]. 中国兽医科技，2004，22（11）：11-15.